ELISA

Come il Western blotting, anche l’Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (saggio di immunoassorbimento legato a enzima, ELISA) si basa sulla rivelazione di un anticorpo secondario che si lega all’anticorpo primario.

Questo metodo si usa per determinare la presenza o meno, in una sospensione o in un siero, dell’anticorpo contro un particolare antigene.

La proteina-antigene viene utilizzata per rivestire il fondo di una piastra per colture cellulari.

La sospensione viene versata nella piastra: se sono presenti anticorpi, essi si legheranno all’antigene direttamente nella piastra. Poi l’anticorpo secondario viene fatto interagire con l’anticorpo primario.

In questo caso l’enzima coniugato all’anticorpo secondario, utilizzato per rivelarne la posizione, è la fosfatasi alcalina. In presenza di un particolare reagente essa produce fosfato inorganico, che forma un precipitato colorato in corrispondenza dell’anticorpo secondario.

Il Western blotting

Reazioni di immunoprecipitazione